分析激酶和其蛋白底物的磷酸化特征是必要于明白细胞怎么识别和响应其环境的变化。人类磷酸激酶阵列(目录编号ARY003B))是用于同时检测43激酶和2个有关的完成蛋白质的快速,灵敏和经济的工具。使用这方法让您不需要执行大量免疫沉淀和蛋白质印迹。我们用于从已知表达目标蛋白的细胞谱系来,精挑细选地捕获抗体。每个捕获抗体在硝酸纤维素膜上斑点一式两份,然后用于磷酸化特异抗体和化学发光检测方法测定磷酸化蛋白度。
同时检测在一个样本里以下蛋白质的相对磷酸化度。 | ||
Akt (S473) | Hck (Y411) | PRAS40 (T246) |
Akt (T308) | HSP27 (S78/S82) | Pyk2 (Y402) |
AMPK alpha1 (T174) | HSP60 | RSK1/2/3 (S380/S386/S377) |
AMPK alpha2 (T172) | JNK pan (T183/Y185, T221/Y223) | Src (Y419) |
beta-Catenin | Lck (Y394) | STAT2 (Y689) |
Chk-2 (T68) | Lyn (Y397) | STAT3 (S727) |
c-Jun (S63) | MSK1/2 (S376/S360) | STAT3 (Y705) |
CREB (S133) | p27 (T198) | STAT5a (Y694) |
EGF R (Y1086) | p38 alpha (T180/Y182) | STAT5a/b (Y694/Y699) |
eNOS (S1177) | p53 (S15) | STAT5b (Y699) |
ERK1/2 (T202/Y204, T185/Y187) | p53 (S392) | STAT6 (Y641) |
FAK (Y397) | p53 (S46) | TOR (S2448) |
Fgr (Y412) | p70 S6 Kinase (T421/S424) | WNK-1 (T60) |
Fyn (Y420) | PDGF R beta (Y751) | Yes (Y426) |
GSK-3 alpha/beta (S21/S9) | PLC gamma-1 (Y783) |
精挑细选的捕获抗体在硝酸纤维素膜上斑点一式两份。细胞裂解液样本被稀释,然后跟生物素化检测抗体混合物一起混合。以后用于整列孵化样本和抗体混合物。如何存在的蛋白质/检测抗体复合物会跟同源固定的捕获抗体在膜上结合。加入链霉亲和辣根过氧化物酶和化学发光检测试剂,然后一个跟结合细胞因子的数量比例的信号会生成。化学发光用于像免疫一样的方法检测。
每个人类磷酸激酶抗体阵列套盒包括大部分必需的部件,不需要其他特别部件就能马上完成一个测定。
请查看产品数据表的“提供的内容/其他需要的耗材”部分以看完整的套盒内容和需要的耗材列表。