3D 培养和类器官

 

                 

荷兰科学家Hans Clevers教授首次发现肠道干细胞的标志物Lgr5+,在2009年成功建立肠道类器官,由此开创了类器官时代。类器官技术的开发为科学研究带来了突破,也为精准医疗和再生医学带来了新的可能。Bio-Techne旗下品牌ACD对Hans Clevers进行了采访,点击视频即可观看。

Bio-Techne 提供丰富齐全的产品,旨在促进类器官稳健生长,同时保持一致、可重现的培养条件。我们提供基底膜提取物(包括新型 Cultrex™ UltiMatrix RGF 基底膜提取物)以及生长因子、小分子、培养基和培养基补充剂。此外,我们还提供抗体和 RNAscope™ 原位杂交分析,用于识别谱系特异性标志物。

类器官研究实用三件套 和 RNAscope,扫码即可免费获得!!!三件套包括:《基底膜提取物入门技术指南》、《3D 培养和类器官实验技术手册》、《肿瘤类器官操作指南》,已帮助超过1000+老师成功建立类器官实验体系,不容错过!

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什么是类器官?

类器官是在特定培养条件下,使用原代组织、胚胎干细胞 (ESC) 或诱导的多能干细胞 (iPSC) 在体外生成的一种微器官。研究人员已为多种人体组织开发了类器官系统,包括肠、胃、结肠、肝脏、肺、心脏、胰腺、肾脏、前列腺、内耳、脑和心脏等。这些 3D 体外模型系统为研究器官发育、研究生理学和疾病、筛选药物和探索个性化用药开辟了新的途径。Bio-Techne 提供丰富的产品,目标是促进类器官稳健、可重现地生长。从基底膜提取物到生长因子和小分子,我们拥有建立理想类器官培养条件所需的试剂,能够减少实验的变异性。

1. Cultrex 基底膜提取物

Cultrex 基底膜提取物是从Engelbreth Holm Swarm(EHS)肿瘤中纯化的细胞外基质。基底膜用于促进和维持内皮细胞、上皮细胞、平滑肌细胞、腺细胞和神经元中的分化表型,还用于血管生成测定、细胞侵袭测定、神经突增测定和体内致瘤性测定。

Cultrex BME产品包装

R&D Systems Cultrex BME系列产品特点:

  • 提供适用于类器官的不同类型
  • 经过优化,可提高球状体、类器官和干细胞培养物的性能和一致性
  • 配方中减少生长因子,可提供更明确的培养系统
  • 质量控制,确保批次间性能的一致性

点击链接观看基质胶使用方法:

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Cultrex BME选用指南

产品名称 体积 货号 应用
Cultrex BME 5ml 3432-005-01 通用型,可以用于2D和3D培养,细胞贴壁和侵袭实验
Cultrex Stem Cell Qualified RGF BME 5ml 3434-005-02 干细胞培养专用
Cultrex Ready BME, Stem Cell Qualified RGF 50ml 3434-050-RTU 即用型干细胞培养级别产品,专用于2D培养铺板使用
Cultrex Organoid Qualified RGF BME, Type 2 5ml 3533-005-02 生长旺盛型类器官专用基质胶
Cultrex RGF Basement Membrane Extract, Type 2 Select 5ml 3536-005-02 生长旺盛型类器官专用,BME Type 2优选版
Cultrex UltiMatrix RGF Basement Membrane Extract 5ml BME001-05 通用型,高浓度基质胶,可以用于ES/iPSC的2D铺板培养、类器官生长和3D组织球形成
Cultrex Basement Membrane Extract, Type 3, Pathclear 5ml 3632-005-02 体内成瘤/异种移植专用基质胶

细胞外基质蛋白

除了我们精选的Cultrex基底膜提取物外,我们还提供各种细胞外基质蛋白,包括胶原蛋白I胶原蛋白IV纤连蛋白层粘连蛋白I玻连蛋白。这些蛋白质是细胞外基质的主要结构成分,通过与位于细胞表面的整合素的相互作用促进细胞通讯。这些相互作用支持组织结构并调节细胞附着,生长,分化和迁移等过程,这些过程在胚胎发生,伤口愈合和肿瘤发生过程中很重要。我们的细胞外基质蛋白产品组合已获得干细胞和 3D 细胞培养应用的鉴定。

2. 类器官培养重组蛋白

确定和优化培养类器官的条件在技术上具有挑战性。类器官培养基中最重要的成分是生长因子,它们需要具有高度活性,并在不同批次之间表现出最小的变异性,以确保它们促进类器官生长并帮助建立可重复的培养条件。

Cultrex UltiMatrix

R&D Systems 重组蛋白用于类器官培养的优势

  • 我们提供了一整套常用于类器官培养的 R&D Systems 蛋白产品,包括最难表达和纯化的蛋白,如 R-Spondin-1、Noggin 和 Wnt-3a
  • 严格的生物活性和批次间一致性测试
  • 极低内毒素水平 (<0.1 EU/µg),达到业内领先的标准
  • 高文献引用率,高活性
  • 可批量订购,并提供定制蛋白服务

用于培养类器官的蛋白质的生物活性和批次间一致性测试示例

Noggin

R&D Systems 重组人Noggin蛋白比来自竞争对手的重组人Noggin蛋白活性高30倍,并且显示出最小的批次间变异性。

R-Spondin

R&D Systems重组人 R-Spondin 1蛋白的活性是竞争对手的重组人 R-Spondin 1 的 7 倍,并且表现出最小的批次间变异性。

Wnt 3a

R&D Systems重组人Wnt-3a蛋白比来自竞争对手的重组人Wnt-3a蛋白活跃1.7倍,并且显示出最小的批次间变异性

欲了解更多R&D Systems类器官培养重组蛋白信息,请访问首页https://www.rndsystems.com/cn

3. 类器官培养小分子

小分子越来越多地用于生长和维持类器官,由于他们的易用性,高效性和特异性。并且,化学合成的小分子具有低批次间变异性和高纯度。Tocris Bioscience是创新的高性能生命科学研究试剂的领先供应商。Tocris的小分子和多肽代表了新颖且独特的研究工具合集,包括GPCR配体、离子通道调节剂、酶抑制剂、笼状化合物、荧光探针和化合物筛选文库。

欲了解更多Tocris类器官培养小分子的产品信息,请访问官网https://www.tocris.com/cell-biology/organoids

Cultrex UltiMatrix

  • 提供用作3D生长基质组分的
    Tocris小分子以及类器官长期生长所需的添加剂,品类齐全
  • 我们的目录产品包括 ALK 激酶抑制剂 A 83-01、高选择性 GSK-3 抑制剂 CHIR 99021、强效 ROCK 抑制剂 Y-27632 二盐酸盐、p38 MAPK 抑制剂 SB 202190 等

欲了解更多Tocris类器官培养小分子的产品信息,请访问官网https://www.tocris.com/cell-biology/organoids

4. RNAscope™原位杂交分析

在类器官研究中,获取表达某个特定基因的细胞定位至关重要。RNAscope™是一项以 ACD 专利技术为基础的新型RNA专利原位杂交(ISH)检测方法,可以在放大信号的同时抑制背景噪音。RNAscope™可以在同一检测过程中,在单细胞分辨率下对不同的 RNA 进行定量分析,并且在兼具高灵敏度和高特异性的同时提供精准的定位信息。

产品优势:

  • 灵敏度高:级联信号放大设计提升了检测灵敏度,从而可以检测到单拷贝RNA分子。
  • 特异性强:专利探针设计确保了靶向特异性结合,而双Z探针设计可以抑制非特异性杂交信号扩增。
  • 保留形态学特征:可以在复杂的组织环境中进行基因表达的空间解析。
  • 单细胞水平定量:高灵敏度和形态学特征的结合实现了单细胞分辨率上的单分子检测。
  • 通用性:几乎适用于所有组织类型中的所有基因。

欲了解更多RNA ISH或RNA-Protein Codetection产品信息,请访问官网:https://acdbio.com/

RNAscope相关资源:

5. 其他试剂

除Cultrex 基底膜提取物、生长因子和小分子产品外,Bio-Techne还提供用于支持类器官培养的无血清培养基补充剂(N2 MAXN21-MAX可等效替代B-27 supplement)、组织透明化试剂盒以及各类抗体,用于识别谱系特异性标志物。

6. 相关资源

(1) bilibili网站,搜索“Bio-Techne” ,海量类器官应用webniar及实操视频,等你发现!

类器官研究bilibili 实操视频

Webinars

实操演练

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